Técnicas de Edición Ácidos Nucléicos para el Síndrome de Laron.

La perspectiva a largo plazo para las personas con Síndrome de Laron (SL) es generalmente bueno. La condición no parece afectar la vida útil y el tratamiento con ADN recombinante resulta efectivo, por lo tanto estas técnicas de edición genómica no son muy empleadas en el tratamiento del SL. Sin embargo, estas si se usan paran crear  animales transgénicos que sirven como modelos de enfermedades humanas  para estudiar los mecanismos del SL [1] e incluso como métodos de optimización creando micro-pigs [2]. 

En comparación con las ratas o los ratones, los cerdos están más cerca de los humanos fisiológicamente y genéticamente, lo que los hace potencialmente más útiles como un organismo modelo para las enfermedades humanas. Sin embargo, su tamaño más grande significa que cuestan más para mantener y requieren dosis más altas de medicamentos cuando se usan para probar un medicamento experimental caro.

Para la ruptura del gen GHR asistida por CRISPR/Cas utilizando un ARNsg específico para el exón 3, secuencia 5´-TTCATGCCACTGGACAGATG- 3´, se clonó un oligonucleótido correspondiente en el vector pEX-AU6-gRNA. Luego el ARNm de Cas9 y el ARNsg se transcribieron in vitro utilizando el kit Ambion Maxiscript SP6. Los cigotos porcinos se produjeron in vitro, y se inyectaron ARNm y sgRNA de Cas9 en su citoplasma, posteriormente se inyectaron en hembras pseudopreñadas[1]. Otro método para crear los micro-pigs , editados genéticamente, se hicieron a través de  clones usando células tomadas de un feto. Pero antes de comenzar la clonación, utilizaron TALEN para deshabilitar uno de las dos copias del gen receptor de la hormona del crecimiento  en las células fetales. Sin el receptor, las células no reciben la señal de "crecimiento" durante desarrollo, resultando en cerdos atrofiados[2].

Bibliografía:

1. Hinrichs, A., Kessler, B., Kurome, M., Blutke, A., Kemter, E., Bernau, M., … Wolf, E. (2018). Growth hormone receptor-deficient pigs resemble the pathophysiology of human Laron syndrome and reveal altered activation of signaling cascades in the liver. Molecular Metabolism, 11, 113–128.doi:10.1016/j.molmet.2018.03.006 . Tomado de: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6001387/pdf/main.pdf
2. Cyranoski D. Gene-edited pigs to be sold as pets. Nature [Internet]. 2015;526(7571):18. Disponible en : https://www.nature.com/news/gene-edited-micropigs-to-be-sold-as-pets-at-chinese-institute-1.18448